下面是小编为大家整理的WBC分类记数分析和总结（范文推荐）,供大家参考。
考核项目五
WBC 分类记数
【学习目的和要求】
1. 掌握WBC分类记数的操作方法。
2. 了解WBC分类记数的临床意义。
【器材】
采血针、显微镜、载物片、分类记数器、吸管、染色液、缓冲液、干棉球、酒精棉、碘酒、保定台或保定柱等。
一、血液检验
( ( 一) ) 血液的采取
血液的采取采血的部位和方法,根据检验项目、所需血量和动物种类的不同,可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。常用血检项目中除血沉测定和红细胞压积测定需较多量血液外,其他各项测定均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管法采血。
1、毛细血管采血法 常用血液检验项目中除血沉测定和红细胞压积测定需较多量的血 液外，其他各项测定用血量较少，均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管法采血。采血前，先将局部剪毛，要尽量剪短，再用酒精棉球消毒， 待酒精挥发、干燥后，用消毒的干燥针头迅速刺入消毒部位约2～3mm深， 让血液自然流出。如血液不易流出时，可在刺入部的上方稍加按压，但勿用力强挤，以免混入过多的组织液。开始流出的第1滴血，可用于制作血片；然后用干棉球擦去局部的剩余血液，利用重新流出的第2滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定；若利用第3滴血液时，仍然要将第2滴血液的剩余部分擦干，使局部皮肤干燥，否则以后流出的血液易分散，不能形成滴状，不易吸取。对犬、猫等小动物耳缘采血时，可在局部剪毛、消毒后，涂布一层凡士林，然后在局部刺入，流出的血液易成滴状，便于吸取。利用毛细血管血液时，取血动作要迅速，可做多项测定，如果操作不熟练，动作缓慢往往引起血液凝固。利用毛细血管血液作多项测定时，一般应先作红细胞计数测定，后作血红蛋白或白细胞数测定。
2、静脉采血法 马、牛、羊可由颈静脉采血（具体部位和方法，见注射法部分）。猪可由前腔静脉采血（详见注射法部分）。鸡可由翼下静脉采血，即用细针头刺入翼下静脉后，任血液自行流出并将其接入试管中。犬、猫可利用小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉。局部剪毛消毒后，用止血带扎住采血部上端或由助手握住采血部位近心端，使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头，针头斜面向上，先以约30度角穿刺静脉
前2～3mm处的皮肤，然后再穿刺静脉壁入静脉腔，待见有血液流入注射筒内后，将针头顺势向静脉腔内推入少许，以防动物骚动时针头滑出静脉。用右手食指将针头固定，左手慢慢抽血，抽血时不可过分用力，以免引起溶血。待抽至所需血量后，先放松止血带，再用消毒棉球按住伤口，拔出针头。除去注射器上的针头，将血液沿管壁缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时，试管内应加抗凝剂，并立即混匀，以免凝固。
3、心脏采血法 多用于鸡及实验动物需多量血液时。鸡可由胸腔入口处向心脏刺 入，刺入心脏时，由于心腔压力较静脉高，血液可自然涌入注射器，兔及鸡等亦可在左侧胸部第1、2肋间，摸到心搏动明显处，针头与胸壁呈垂直方向缓缓刺入，针头进入心腔内时，血液可自然进入注射器。
（二）血清快速分离法
如需迅速分离血清（特别对牛），可将盛血管放入离心机内，以2,500r/min的速度离心3min，使红细胞与血浆分离，然后放入37℃温箱内30min促使血块加速凝固、收缩，可迅速分离到较多的血清。
（三）血液抗凝法
供检血最好采取后随即进行检验。若不能立即检验，为防止血液凝固，可加入抗凝剂，并应充分混合之。常用的抗凝剂有：
（1）
草酸钠是最常用的抗凝剂，为白色粉末状，每1.5～2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常规检验。但因其对红细胞大小有影响，故不能用作红细胞压积测定，如需测定红细胞压积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。
（2）
双草酸盐抗凝剂：草酸钾0.8g；草酸铵1.2g；蒸馏水加至100.0ml。
溶解后，吸取0.5ml，加于供采血用的试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不能超过80℃），烘干备用（实际含双草酸盐10mg，可供5ml全血抗凝用）。
（3）3.8％枸橼酸钠溶液主要用于血沉测定时的抗凝。
（4）乙二胺四乙酸二钠（EDTA二钠）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成 10％溶液，每2滴可使5ml全血抗凝。
怀疑传染病时，采血过程应防止到处流散，检后的残余血液及所用器皿亦应进行消毒处理。
二、白细胞分类计数方法
以百分率表示各种类型白细胞间的数量关系 ,称为白细胞分类计数。
( 一) 原理
白细胞分类计数法是将血液制成分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色，根据各类白细胞着色特征予以分类计数，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。
( 二) 器材与试剂
载玻片、染色盆及支架、染色缸、洗瓶、显微镜及镜油、白细胞分类计数器、吸水纸等。
1、瑞（Wright）氏染液 瑞氏染粉0.lg，甲醇60.0ml。将染色粉置于研钵中，加少量甲醇研磨， 使其溶解，然后将已溶解的染液倒入洁净的棕色玻瓶，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此继续操作，直至全部染料溶解并用完甲醇为止。在室温中保存7日(每日振摇1次)后，过滤,即可应用。新配制的染液偏碱性，放置后可呈酸性。保存时间愈久，染色力愈佳。
2、姬姆萨（Giemsa）氏染液 姬姆萨氏染粉0.5g，纯甘油(中性)33.0ml，纯甲醇33.0m1。先将染粉置于研钵中，加入少量甘油，充分研磨，然后加入其余量的甘油，水浴加温（60℃）1~2h，经常用玻璃棒搅拌，使染色粉溶解，最后加入甲醇混匀,装棕色瓶中保存1周后过滤即成原液。临用时取此原液1ml，加pH6．8的缓冲液或新鲜蒸馏水10ml，即成应用液。
3、瑞—姬氏复合染色液 瑞氏染粉 1.0g，姬姆萨氏染粉 0.3g，中性甘油 10ml，甲醇 500ml。先将瑞氏染粉与吉氏染粉置于研钵中，加入少量甘油和甲醇，充分 研磨，吸出上层染液置棕色瓶中，在加甲醇继续研磨，再吸出上液，如此连续数次，直至 500ml 甲醇用完。配好每天早、晚各振摇 3 min，共5 天，存放 1 周后可使用。
4、缓冲液的配制 1％磷酸二氢钾30.0ml；1％磷酸氢二钠20.0ml；蒸馏水加至1,000.0ml 所有染料对氢离子浓度均较敏感，染色时由于酸碱度的改变，蛋白质与染料所形成的化合物可重新离解，故染色时染液的pH能够影响染色的结果。
瑞氏染色的适当pH为6.4～6.8。当染液偏于碱性时，可与缓冲液中酸基起中和作用；染液偏酸性时，可与缓冲液中碱基起中和作用；维持 染色时的一定酸碱度，才能使染色结果满意。磷酸氢二钠（Na HPO ）
0.2g，磷酸二氢钾（KH 2 2 4 PO ）0.3g。
4 ( 三) 涂片方法
取数张清洁、干燥、脱脂的玻片,作为载片，选择边缘光滑、平整
的载片作为推片（推片一端的两角应磨去，也可用血细胞计数板的盖玻片做为推片），用左手的拇指及中指夹持载片，右手持推片；先取被检血一小滴，放于载玻片的右端，将推片倾斜 30°～40°角，使其一端与载片接触并放于血滴之前，向后拉动推片，使与血滴接触，待血液扩散形成一条线状之后，以均等的速度轻轻向前推动推片，则血液均匀地被涂于载片上而形成一薄膜，自然风干,待染。良好的血片，血液应分布均匀，厚度要适当，对光观察时呈霓红色，血膜应位于玻片中央，两端留有空隙，以便注明畜别、编号和日期。
血片制作时应注意：血滴愈大、推片与载片角度愈大，则血膜愈厚； 推片时勿过于用力，速度应均匀、适宜，中间不能停顿；血膜涂于载片中央的 2/3 区域内，两端稍留空隙，以便标明号码及日期；载片须彻底脱脂，并清擦干净，以防血膜中出现空泡；血液应新鲜，操作宜迅速， 以防凝血，冬季注意保温，以防冻后溶血；夏季注意苍蝇舐食血膜。
( 四) 染色方法
1、瑞氏染色法 是最常用的染色法之一。将自然干燥的血片用蜡笔于血膜之两端各划一道横线，以防染色液外溢。置血片于水平支架上，滴瑞氏染液于血片上，并计其滴数，直至将血膜浸盖为止，待染1～2 min 后，滴加等量缓冲液或蒸馏水，轻轻摇动或以口吹动使染色液与缓冲液混合均匀 ,再染 4～10 min，用蒸馏水冲洗，待自然干燥或用吸水纸吸干后，油镜观察。
染色时应注意：滴加染液的量勿过多或过少，过多则玻片上不能容纳而流失，造成浪费；过少时甲醇蒸发后易留下沉淀物。滴加缓冲液后， 应使之与染液混匀，否则血片可发生染色浓淡不均现象。在冲洗血片时， 应将载片平持，使水自玻片边缘溢出，沉渣从液面浮去，切勿先将染液倾去，以免沉淀物附着于血片上。
染色良好的血片呈樱桃红色，如呈深紫色，为染色时间过长；呈红 色，为染色时间过短。
染液若过酸，可使红细胞呈鲜红色，白细胞核往往不易着色或着色很淡；若过碱，则白细胞核着色过深，故需用缓冲液加以调整。
所用缓冲液以新鲜配制者为好，如以陈旧蒸馏水代替缓冲液，需在用前将蒸馏水煮沸 15～30min，待冷后使用，以除去水中碳酸。
2、姬姆萨氏染色法 涂片先用甲醇固定 1～2 min。将血片直立于装有姬姆萨氏应用液的染色缸中，染色 30～60 min（根据室温高低和血片厚度）。取出用蒸馏
水冲洗，干燥后镜检。染色良好的血片呈玫瑰红色。如显灰色及青灰色， 表示染色液过碱；呈鲜红色，则表示染色液过酸或染色时间过短。本法所染血片，清晰鲜艳，各种白细胞易于辨别并适用作血液原虫的检查。3、瑞氏与姬姆萨氏复合染色法 将血片置于染色架上，滴加染液 3～5 滴，使其迅速布满血膜，约 1 min 后，滴加缓冲液5～10 滴，轻轻摇动玻片使之充分混合，5～10 min 后用流水冲去染液，待干镜检。
( 五) 分类计数
先用低倍镜做大体观察,检视血片上白细胞的分布情况，边移动血片边检视白细胞并计数。一般是粒细胞、单核细胞及体积较大的细胞分布在血片的上、下缘及尾端，淋巴细胞多在血片的起始端。滴加显微镜油，转过油镜头进行分类计数。
计数时，为避免重复和遗漏，可用四区、二区或中央曲折计数法， 推移血片，记录每一区的各种白细胞数。每张血片最少计数100个白细胞（如分二区计数，则每区计50个；分四区计数，则每区计25或50个）， 连续观察2～3张血片，求出各种白细胞的百分比。
健康家畜各类白细胞分类正常数值（％）
畜种类 嗜碱性 细胞 嗜酸性细 胞
幼稚型 嗜中性细胞 杆状型
分叶核 淋巴细胞 大单核 细胞 马 0.5 4.5 0.5 5.0 53.0 35.0 3.0 牛 0.5 4.0 1.0 1.0 33.0 56.0 2.0 水牛 0.5 10.0
4.0 35.0 47.0 3.0 猪 0.5 2.5
4.0 35.0 53.0 3.0 羊 0.5 5.5
4.5 35.0 57.0 3.0
( 六) 各种白细胞的形态特征
各种白细胞的形态特征主要表现在细胞核及细胞浆的特有形状上， 并应注意细胞的大小。根据胞浆中有无染色颗粒,将白细胞区分为颗粒细胞和无颗粒细胞。前者又根据胞浆染色颗粒的着色特征,而分为嗜碱性、嗜酸性及嗜中性白细胞；后者包括淋巴细胞及大单核细胞。各种白细胞的形态特征详见下表。
白
细
胞分类
细胞核
细胞浆
位
置
形状
颜色
核染
色质
细胞
核膜
多少
颜色
透明
带
颗粒
嗜中性 幼年型 红或蓝，细 致或粗糙 嗜中性 杆状核 嗜中嗜酸 或嗜碱 嗜中性 分叶核 中心 或偏心性 深
3~5 叶居多 浅粉红 色 无 粉红色或 紫红色 嗜酸性 中心白细胞 或偏
心性 2~3 叶居多并 在各分叶间有细丝状连 接
蓝、粉 红色 无
深红， 较 大，分布均匀 深紫色或蓝黑色较 嗜碱性 中心 叶状核不太 白细胞 性 清楚 较淡紫 蓝色 粗糙 存在 多
浅粉红 色 无 小，分布不 均匀，大多 在细胞的边缘 淋巴细 偏心 胞 性 多为圆形或 椭圆形或微 凹入 大 块 深 紫 蓝 色 天蓝深 蓝或淡 红色 胞 浆 深 染时 存 在
无或有少 数嗜天青 蓝色颗粒 大单核 细胞 豆型山字型 淡 紫 椭圆型 蓝 色 中 等 块 或致密细 致网 状边 缘 不齐 浓密 少
偏心 或中心性 存在 很多 灰蓝色 或云蓝 无色 很多非常 细小淡紫色 表 各种白细胞的形态特征(瑞氏染色法)
着
色
偏心 多呈椭圆或 较
淡
细致 不 清 中等 蓝、粉 无
性
肾形。
红
紫
楚
红色
色
弯曲呈粗细
中心 较均匀的带 浅
或偏 状、S 形、马 紫
细致 存在 多
粉红色 无
心性 蹄形、腊肠形 蓝
色
等。
紫
粗糙 存在 多
蓝
色
较紫 色
淡蓝
粗糙
存在
多
（七）临床意义 （1）
白细胞增多 ①嗜中性白细胞增多：见于多数细菌性传染病初期，如猪肺疫、牛出血性败血病、马腺疫等；急性炎症过程，如肺炎等；并常见于机体的化脓性感染。
②嗜酸性白细胞增多：多见于某些寄生虫病、过敏性疾病及湿疹等。
③淋巴细胞增多：主要见于某些慢性传染病，如结核、鼻疽时；也可见
于淋巴细胞性白血病、布氏杆菌病、猪瘟及牛梨形虫病。。
④单核细胞增多：见于败血性疾病，某些梨形虫病（如焦虫病）及李氏杆菌病时。
（2）
白细胞减少 ①嗜中性白细胞减少：可见于某些病毒性传染病；药物中毒，如长期应用某些抗生素；也可见于许多严重疾病的末期。
②嗜酸性白细胞减少：当败血症、某些病毒病时可能减少及牛梨形虫病等；当显著减少时常提示预后不良。
③淋巴细胞减少：多为嗜中性白细胞增多而造成的相对性变化。
有时由于孤立地根据白细胞百分率的变化去分析结果，会产生错觉，所以常应计算其绝对值，即将白细胞总数乘以相应的百分比。
在分析嗜中性白细胞增、减变化时，不仅要结合白细胞总数的增、减变化，并应特别注意嗜中性白细胞的成熟情况。
嗜中性白细胞的成熟情况，以核象的变化为标志。若末梢血液中未成熟的嗜中性白细胞增多，即出现嗜中性髓细胞、幼稚型和杆状核嗜中性白细胞的比例也升高，则称为核左移。若血液内分叶核嗜中性白细胞大量增多，而且核的分叶数目也增多（大部分为4～5叶或更多分叶）， 则称为核右移。
严重的核左移，反映病情危重。如白细胞总数增多的同时，出现核左移，表示骨髓造血机能加强，机体处于积极防御阶段；而白细胞总数减少时见有核左移，则标志骨髓造血机能减退，机体的抗病力降低。至于核右移，乃骨髓造血功能衰退的标志，多由机体高度衰竭而引起，常提示预后宜慎重。